在生物医学研究中，植物免疫反应的机制一直是科学家探索的热点之一。研究表明，农杆菌的注射能够有效地刺激烟草叶片的免疫反应，这为我们理解植物与病原体之间的相互作用提供了重要的实验依据。通过双分子荧光互补（BIFC）技术，我们可以揭示目标蛋白之间的相互作用，例如DgnsLTP1和DgPIP在本氏烟草中的相互作用。

在进行BIFC实验时，需要注意阴性对照的设置，例如使用pCAMBIA1300-YFPn与pCAMBIA1300-YFPc，以及pCAMBIA1300-YFPn-DgnsLTP1与pCAMBIA1300-YFPc的组合。这些对照有助于确保实验结果的可靠性。实验过程中，推荐在进行亚细胞定位之前，对两个基因的表达效率进行评估，以优化转化条件，从而避免假阴性结果的出现。

在样品制备时，确保叶片表面无杂质且气泡被排除，以提高观察结果的清晰度。此外，在显微镜观察时，激发光电压不应设置过高，这样可以清楚地显示烟草细胞的轮廓。此外，荧光素酶互补实验与BIFC实验原理相似，均依赖于荧光的产生来验证蛋白之间的相互作用。因此，控制温度对互补效果至关重要，建议在室温或低于室温的条件下培养细菌或细胞，以维持其正常表达。

通常，我们使用绿色荧光蛋白（GFP）或红色荧光蛋白（RFP）标签来进行观察，但不同类型的蛋白质可能需配合适当的荧光蛋白以优化检测效果。生物医学研究日益依赖双荧光素酶实验，这为解决更多的生物学难题提供了有力支持。

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