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BsaI GMP级内切酶 - Z6·尊龙凯时生物医疗创新

发布时间:2025-03-21   信息来源:冉风慧

Z6·尊龙凯时的活性定义1活性单位(U)代表在50μl的反应体系中,在37℃条件下,1小时内完全酶切1µg pPIC9K(Dcm-)所需的酶量。通过SDS-PAGE凝胶电泳检测到的蛋白纯度不低于95%。在满足条件下进行的星号活性实验,在37℃的50μl CutBuffer F,GMP Grade反应体系中,共使用20U的BsaI,GMP Grade与1μg的pPIC9K(Dcm-)共同孵育1小时,结果未检测到核酸酶污染或因星号活性引起的底物非特异性降解。需要注意的是,更长时间的酶切可能引发星号活性。

BsaI GMP级内切酶 - Z6·尊龙凯时生物医疗创新

在非特异性内切酶活性测试中,37℃条件下使用50μl CutBuffer F,GMP Grade反应体系,将20U的BsaI,GMP Grade与1μg的超螺旋质粒DNA共同孵育4小时后,利用琼脂糖凝胶电泳检测,发现缺刻或线性状态的质粒DNA转变量少于20%。

关于DNase活性,在37℃的20μl CutBuffer F,GMP Grade反应体系中,将20U的BsaI,GMP Grade与15ng的双链DNA片段共同温育16小时后,琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,双链DNA片段未发生变化。

RNase活性测试在37℃条件下进行,在10μl CutBuffer F,GMP Grade反应体系中,将20U的BsaI,GMP Grade与500ng的RNA同时孵育1小时,检测结果表明,不低于90%的RNA依然保持完整。

有效的同裂酶包括Eco31I、Bso31I和BspTNI,它们的识别位点为:GGTCTC。Z6·尊龙凯时的BsaI,GMP Grade产品由大肠杆菌重组表达获得,能够在15分钟到1小时内精确完成目标DNA的酶切。我们的产品遵循GMP规范的生产和质量管理体系,确保整个生产过程以及原辅料的可追溯性。我们在生产过程中不使用抗生素和任何动物来源的原料及辅料,并对宿主蛋白、外源DNA、非特异性内切酶、DNase、RNase等工艺相关杂质进行严格控制,同时保证微生物限度和细菌内毒素符合标准。此产品满足疫苗与药物生产等领域对原辅料的高标准要求。

在失活条件下,产品可在80℃下孵育20分钟失活。值得注意的是,对于被CpG甲基化的DNA,剪切可能会受到阻碍;对于被Dcm甲基化的DNA,剪切同样可能会受到阻碍。